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清空購(gòu)物車(chē)
外周血淋巴細(xì)胞分離管

本品采用密度梯度離心法,根據(jù)細(xì)胞密度差異,借助分離液和離心,進(jìn)行細(xì)胞分離純化。細(xì)胞分離液產(chǎn)生一定程度的密度梯度,經(jīng)離心后,紅細(xì)胞、粒細(xì)胞沉于管底;PBMC(單個(gè) 核細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等)漂浮于分離液的液面上,目的細(xì)胞保留在設(shè)計(jì)的嵌套之上,分離管中獨(dú)特的嵌套,能夠最大程度的減少目的樣品和密度階梯介質(zhì)的混合,最后只需從離心管中簡(jiǎn)單傾倒,而無(wú)需其他技術(shù)性的專業(yè)操作。

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使用方法/ Instructions

前期準(zhǔn)備

1) 將分離液的溫度平衡至室溫(RT),避光。

2) 將分離液用移液管從分離管嵌套的中心孔中加入:15ml的分離管需要加入約4ml分離液;50ml的分離管需要加入約13ml分離液,確保分離液覆蓋嵌套上方。

3) 平衡至室溫后的分離管就可以加入抽取的抗凝血和骨髓了。雖然加入稀釋標(biāo)本的生理鹽水不是十分必要,但是它能幫助提高分離效果。

分離過(guò)程

加入細(xì)胞分離液                                   加入樣本                             離心后分層          收集富集細(xì)胞、重復(fù)洗滌


1) 將抗凝樣本(血或骨髓,如果需要可以用生理鹽水稀釋)延管壁緩慢倒入或用移液管延管壁緩慢加入到分離管中:如果用15ml的分離管建議使用4-9ml樣本;如果用50ml的分離管建議使用13-30ml樣本。
2) 室溫下離心,離心力為1200 x g需要10分鐘,關(guān)閉離心機(jī)。對(duì)于放置24h以上的樣品,建議離心時(shí)間加長(zhǎng)。
3) 離心后液體分離情況(從上到下)為:a血漿 ;b富集的細(xì)胞部分(中間相包含淋巴細(xì)胞/PBMCs細(xì)胞);c分離液;d嵌套;e沉淀(紅細(xì)胞和粒細(xì)胞)。采集或丟棄富集細(xì)胞所在層以上5到10mm的血漿層有助于防止富集細(xì)胞被血小板再次污染。
4) 收獲富集細(xì)胞(淋巴細(xì)胞/PBMCs細(xì)胞),將分離管中上清倒入另一干凈離心管中,分離管中的嵌套能有效避免富集細(xì)胞被紅細(xì)胞和粒細(xì)胞再次污染。建議不要將分離管倒置2s以上。
5) 用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌富集細(xì)胞(淋巴細(xì)胞/PBMCs細(xì)胞),然后在250 x g離心力下離心10分鐘。
6) 按步驟5重復(fù)洗滌2次,最后用5ml PBS緩沖液重新懸浮細(xì)胞。


注意事項(xiàng)/ Cautions
1) 本產(chǎn)品應(yīng)由經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)的人員操作,并遵守良好的實(shí)驗(yàn)室規(guī)范。
2) 請(qǐng)勿重復(fù)使用分離管。
3) 由于各品牌離心機(jī)的性能不同,地區(qū)溫度環(huán)境差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)速和離心的時(shí)間,摸索最佳的分離條件(具體分離條件由各實(shí)驗(yàn)室自定)。
4) 可用于人類外周血、骨髓和臍帶血樣本。它不適用于白細(xì)胞分離樣本、血沉棕黃層樣本或超過(guò)48小時(shí)的樣本。
5) 離心后,細(xì)胞可能聚集在富集層以上的分離管的管壁上。這種聚合是正常的,受樣本質(zhì)量、樣本放置時(shí)間和抗凝劑類型的影響。此聚合與分離管的使用無(wú)關(guān)。細(xì)胞可以通過(guò)使用移液管尖端刮管壁的一側(cè)來(lái)清除。
6) 處理任何生物來(lái)源的標(biāo)本,使用采血針、采血管系列、相關(guān)儀器等一定要注意按嚴(yán)格的操作規(guī)程使用。請(qǐng)把標(biāo)本當(dāng)成可能感染 HIV、HBV、HCV等傳染病的危險(xiǎn)物質(zhì)處理。為避免操作時(shí)感染的危險(xiǎn),請(qǐng)使用一次性手套。


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