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2022-10-263200 次瀏覽
萬能的間充質干細胞

什么是干細胞

多年來對干細胞的定義不斷進行修正,并從不同的層面上來進行定義 。目前大多數生物學家和醫(yī)學家認為干細胞是來自于胚胎、胎兒或成人體內具有在一定條件下無限制自我更新與增殖分化能力的一類細胞,能夠產生表現型與基因型和自己完全相同的子細胞,也能產生組成機體組織、器官的已特化的細胞,同時還能分化為祖細胞 。



什么是間充質干細胞

間充質干細胞是干細胞的一個研究分支,干細胞是一類具有自我復制和多向分化能力的細胞,它們可以不斷地自我更新,并在特定條件下轉變成為一種或多種構成人體組織或器官的細胞。干細胞是機體的起源細胞,是形成人體各種組織器官的始祖細胞。

一類存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等),具有多向分化潛力,非造血干細胞的成體干細胞。這類干細胞具有向多種間充質系列細胞(如成骨、成軟骨及成脂肪細胞等)或非間充質系列細胞分化的潛能,并具有獨特的細胞因子分泌功能,細胞模型被應用于增殖、移植和分化研究,以及體外的免疫反應的鑒定。



間充質干細胞的特性
1.對塑料的黏附的,細胞具有貼壁依附性。


2.特異性表面抗原表達-陽性和陰性的標記物。



3.多能分化,在體外可以分化成成骨,脂肪和軟骨細胞。



間充質干細胞的用途
1.神經系統(tǒng)
間充質干細胞分泌組作為神經源性生態(tài)位調節(jié)劑∶ 可揭示基本原理和治療機會。
2.骨骼系統(tǒng)
間充質干細胞用于控制骨關節(jié)炎∶最新技術和展望。
3.肝臟
間充質干細胞用于肝臟修復的治療前景。
4.心臟
間充質干細胞來源的炎性成纖維細胞可介導衰老心臟的間質纖維化。
5.肺
間充質干細胞來源的微泡在肺疾病中的作用。
6.腎臟
間充質干細胞與慢性腎動脈狹窄。
7.胰腺
使用間充質基質細胞制備替代β細胞∶ 展望和未來努力方向。
8. 腫瘤免疫治療
改造間充質干細胞可為消除腫瘤生長提供持續(xù)濃度的高效特異性抗體。

間充質干細胞培養(yǎng)實驗
試劑:Gibco基礎培養(yǎng)基,Gibco胎牛血清,75%酒精
耗材:Nest 50ml離心管,Nest 10ml血清移液管,Nest T225透氣蓋細胞培養(yǎng)瓶 ,Nest 20μl吸頭
設備:離心機,水浴鍋,培養(yǎng)箱,移液槍,細胞計數儀,顯微鏡
準備:將胎牛血清按比例適當加入基礎培養(yǎng)基中,配制成完全培養(yǎng)基。
實驗步驟:
1. 從-196°C液氮罐取出1支間充質干細胞凍存管。
2. 即刻將凍存管置入37°C水浴鍋中勻速擺動,持續(xù)一分鐘左右,使直到管中只剩下最后一片結晶(注意:不要讓水沒過產品管)。
3. 用酒精擦拭管口。
4. 取20ml完全培養(yǎng)基加入離心管中,將融化好的細胞懸液加入到完全培養(yǎng)基中并充分混勻。
5. 取20ul混勻好的細胞懸液,用細胞計數儀計數。
6. 細胞懸液在1400rpm,室溫條件下,離心5分鐘,去上清。
7. 加入10-20ml完全培養(yǎng)基輕輕混勻細胞。
8. 每個T225細胞培養(yǎng)瓶中加入50ml完全培養(yǎng)基。
9. 按10 000-15 000個細胞/cm2接種細胞,平放搖勻使細胞分布均勻,在顯微鏡下觀察細胞分布狀態(tài),放入37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
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