久久婷婷五月综合色欧美_久久精品国产亚洲avapp下载_中文字幕精品一二三四五六七八_国产三级在线观看播放_亚洲香蕉成人av网站在线观看

購物車(
清空購物車
2023-09-1525713 次瀏覽
0元試用 | 試用招募,強強聯(lián)手解鎖細胞侵襲實驗!

0元試用!!

掃碼或點擊鏈接填寫試用申請表

https://forms.ebdan.net/ls/p6XvZDi0?bt=yxy&eip=true




腫瘤細胞轉(zhuǎn)移主要包括以下5個過程:

原位侵襲(Local invasion),

腫瘤細胞內(nèi)滲(Intravasation),

循環(huán)系統(tǒng)存活(Survival in the circulation)

腫瘤細胞外滲(Extravasation),

形成轉(zhuǎn)移灶(Micrometastasis formation)等。


其中細胞侵襲發(fā)生在第一步,即腫瘤細胞在原位突破基底膜,然后內(nèi)滲進入血管、淋巴管的過程。其侵襲性是腫瘤相關(guān)信號通路、藥物治療、靶向治療、致癌/抑癌基因等腫瘤學(xué)研究的一個重要指標。


(腫瘤細胞轉(zhuǎn)移過程,來源DOI:10.1016/j.cell.2011.09.024)


腫瘤細胞侵襲實驗通常利用細胞小室(常用6孔、12孔、24孔板等)進行檢測。


與腫瘤細胞遷移實驗不同的是,需在聚碳酸酯膜上側(cè)鋪一層基質(zhì)膠,用以模仿細胞外基質(zhì)。

腫瘤細胞必須分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)消化基質(zhì)才能進入下室,更好的模擬了動物體內(nèi)的情況。


侵襲實驗過程

向上滑動閱覽

a. 基質(zhì)膠包被:

(a) 將基質(zhì)膠置于冰中并在4℃融化,使用預(yù)冷的移液管或吸頭混合基質(zhì)膠至均勻狀態(tài)。
(b) 在冰上,將基質(zhì)膠用無血清培養(yǎng)液按照1:8的比例進行稀釋,例如取8μl基質(zhì)膠加入64μl不含血清的培養(yǎng)液中,使用預(yù)冷的吸頭混合至均勻狀態(tài)。

注:常用的稀釋比例為1:4、1:6、1:8,可根據(jù)實驗具體情況調(diào)整稀釋比例。
(c) 取60μL上述混合溶液垂直加入細胞小室中,使其均勻平鋪在底部。

(d) 吸出未結(jié)合的基質(zhì)膠。

(e) 加入100μl不含血清的培養(yǎng)液,將培養(yǎng)板置于37℃培養(yǎng)箱孵育30分鐘,進行水化。
(f) 去除小室中液體,檢查是否有液體穿過小室進入到下室中,若沒有,則可用于接種細胞。


b. 細胞懸液的制備:
(a) 對細胞進行12-24小時的饑餓處理。(非必需步驟)
(b) 消化細胞,用不含血清的培養(yǎng)液重懸,調(diào)整細胞密度為5-50萬個/mL。


c. 細胞接種:
(a) 取500μL含10% FBS的培養(yǎng)液加入24孔板下室,用鑷子將細胞小室置于24孔板內(nèi)。

(b) 取200μL細胞懸液加入細胞小室。
(c) 將24孔板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時。


d. 細胞固定、染色:
(a) 取出細胞小室,去除培養(yǎng)液,用棉簽輕輕擦拭基質(zhì)膠及細胞。
(b) 在24孔板干凈的孔中加入600μl 4%多聚甲醛固定液,將小室放入固定20-30分鐘。
(c) 棄固定液,PBS洗滌小室1次。

(d) 在24孔板干凈的孔中加入適量結(jié)晶紫染色液,將小室放入染色5-10分鐘。
(e) 取出小室,PBS洗滌3次。

(f) 適當(dāng)風(fēng)干后,顯微鏡下觀察并計數(shù)。


除細胞侵襲實驗外,基質(zhì)膠可被用于類器官培養(yǎng)、干細胞分化、血管生成、體內(nèi)腫瘤發(fā)生等多項研究。




亚洲天堂网av中文字幕| 日韩免费视频| 国产精品久久久久乳精品爆| 日日摸天天爽天天爽视频| 领导边摸边吃奶边做爽在线观看| 99热这里只有精品免费播放| 少妇mm被擦出白浆液视频| 国产精品亚洲а∨天堂2021| 无码国产精成人午夜视频一区二区 | 少妇人妻真实偷人精品视频| 少妇把腿扒开让我爽爽视频| 免费的黄网站精品久久| 亚洲中文字幕久久精品无码a| 国产绳艺sm调教室论坛| 久久av喷潮久久av高清| 一本色道婷婷久久欧美| 国产精品白浆无码流出| 中文字幕日韩精品一区二区三区| 免费不卡在线观看av| 性色av蜜臀av色欲av| 欧洲美熟女乱又伦| 亚洲无线码在线一区观看| 护士又紧又深又湿又爽| 国产免费一区二区三区在线观看| 国产精品无码天天爽视频| 国产一区二区三区内射高清| 欧美日韩国产综合草草| 亚洲av之男人的天堂| 爆乳熟妇一区二区三区霸乳| 欲妇荡岳丰满少妇岳| 午夜精品久久久久久久99热| 婷婷五月日韩av永久免费| 日本在线中文字幕一区| 三级特黄60分钟在线观看 | 四房播播影院| 第一福利视频一区二区| 老熟妇高潮喷了╳╳╳| 久久天天躁狠狠躁夜夜avapp| 成人性生交大片免费卡看| 狠狠色噜噜狠狠狠狠777米奇| 尤物yw午夜国产精品视频|