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2023-07-1821782 次瀏覽
使用指南 | 多層細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)貼壁細(xì)胞

貼壁細(xì)胞的應(yīng)用

貼壁細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)領(lǐng)域中常見的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一,它可以應(yīng)用于多種場(chǎng)景,包括但不僅限于:

1.藥物篩選:通過(guò)培養(yǎng)貼壁細(xì)胞,可以測(cè)試藥物的療效和毒性,從而篩選出具有治療潛力的藥物。

2.細(xì)胞學(xué)研究:貼壁細(xì)胞培養(yǎng)可以為細(xì)胞學(xué)研究提供許多有用的信息,例如細(xì)胞分裂、分化和轉(zhuǎn)化等

3.疾病模型:通過(guò)培養(yǎng)患者的貼壁細(xì)胞,可以建立與某些疾病相關(guān)的細(xì)胞模型,例如癌癥。

4.基因編輯:貼壁細(xì)胞培養(yǎng)可以為基因編輯提供重要的支持,例如CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)。

總之,貼壁細(xì)胞培養(yǎng)一項(xiàng)非常重要的生命科學(xué)技術(shù),可以應(yīng)用于許多不同的場(chǎng)景和研究領(lǐng)域。


使用指南



接種細(xì)胞懸液

1.細(xì)胞懸液混勻:按照實(shí)驗(yàn)要求的濃度準(zhǔn)備細(xì)胞,在培養(yǎng)基瓶、培養(yǎng)瓶或其他容器中混勻。建議的工作容積為每層30-50 mL.

2.用移液管緊貼瓶壁緩慢地將液體加到五層細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,避免產(chǎn)生泡沫或者氣泡(每次加液時(shí)移液管內(nèi)液體可留少許)。

注意事項(xiàng): 10 ml移液管可以伸到培養(yǎng)瓶底部使培養(yǎng)基分散開,而25 mL移液管則只能伸到NEST標(biāo)志的地方把液體分散開。

3.把培養(yǎng)瓶有NEST標(biāo)志那一側(cè)朝向自己,順時(shí)針做斜45度左右放置一段時(shí)間,使瓶中各個(gè)隔層的液體達(dá)到平街。

4.輕緩地將培養(yǎng)瓶水平放置于工作臺(tái)上,有NEST標(biāo)志那一面朝上。

5.前后左右輕輕晃動(dòng)多層瓶,液體會(huì)均勻地分布在五個(gè)生長(zhǎng)面上。

注意事項(xiàng):搖晃的動(dòng)作要輕柔,一方面是防止起泡沫,另一方面是要防止培養(yǎng)基港漏到下層中。

移除培養(yǎng)液

 抽吸法 

抽吸的時(shí)候,將多層瓶做斜45度,有NEST標(biāo)志的一面朝向自己。

將移液管伸到底部抽吸培養(yǎng)基,直至完全抽吸完。

 傾倒法 

將有NEST標(biāo)志的一面朝向自己,逆時(shí)針45度傾倒液體。

注意事項(xiàng): 抽吸培養(yǎng)液時(shí)建議使用10 mL移液管,才能將培養(yǎng)液吸盡

收集細(xì)胞

1.用緩沖液清洗一遍以去除殘留的血清,后加入消化液 (> 5 mL層),混勻。

2.消化大約2 min (視細(xì)胞情況而定) ,用消化終止液中和消化液

3.采用移液管抽吸法或做倒法將細(xì)胞懸液置于離心管等容器中。

4.用一定量的緩沖液沖洗多層瓶三次,將沖洗液分別置于離心管中,混勻計(jì)數(shù)或者傳代接種。


產(chǎn)品信息



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